IP-MS互作分析——探究蛋白质相互作用网络

蛋白质之间的相互作用在细胞调控和信号传导中起着关键作用。IP-MS互作分析技术结合了免疫沉淀和质谱技术，可以高效地捕获和鉴定蛋白质之间的相互作用关系，为您提供全面的分析结果，揭示蛋白质交互网络的精细细节。

技术原理

IP-MS互作分析技术的原理基于免疫沉淀的能力，将特定的抗体与目标蛋白质结合。通过将抗体固定在磁珠上，然后与细胞提取物一起处理，可实现目标蛋白质及其相互作用伙伴的选择性捕获。接下来，使用质谱技术对沉淀的蛋白质复合物进行分析，确定相互作用伙伴的身份和数量。

实验流程

1. 1. 免疫沉淀（IP）： 将特定的抗体与目标蛋白质结合，形成蛋白质复合物。
2. 2. 抗体固定： 将抗体固定在磁珠或琼脂糖珠上，以便将蛋白质复合物选择性地捕获。
3. 3. 样品处理： 将细胞提取物与抗体固定的珠子一起处理，实现蛋白质复合物的免疫沉淀。
4. 4. 洗涤： 通过多次洗涤步骤去除非特异性结合的蛋白质，保留目标蛋白质及其相互作用伙伴。
5. 5. 质谱分析： 使用质谱技术对沉淀的蛋白质复合物进行鉴定和分析，确定相互作用伙伴的身份和数量。

6. 6. 数据解析： 利用生物信息学方法分析质谱数据，构建蛋白质相互作用网络。

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