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Cut&tag
发表时间:2021-04-22     阅读次数:

Cut&Tag技术——精准解码蛋白质-DNA相互作用

蛋白质-DNA相互作用是细胞调控的关键环节,而Cut&Tag技术通过结合免疫沉淀和转座酶活性,使得在背景噪音极低的情况下,能够高效地捕获和解析蛋白质-DNA相互作用的位点。通过简化和优化实验流程,Cut&Tag技术为您提供高精度的信息,揭示基因调控和表观遗传学的内在机制。

技术原理

Cut&Tag技术的原理基于转座酶的活性,它能够精确将特定的蛋白质-DNA结合位点暴露在背景噪音低的环境中。通过在蛋白质结合位点附近进行切割,并在背景中进行释放,您将能够捕获到更精准的信号。接下来,这些位点可以通过高通量测序技术进行分析,揭示蛋白质-DNA相互作用的全景图。

实验流程

  1. 1. 免疫沉淀(IP): 将特定的抗体与目标蛋白质结合,使其在细胞中形成免疫复合物。
  2. 2. 转座酶结合: 转座酶与免疫复合物结合,识别和结合到蛋白质-DNA结合位点附近。
  3. 3. DNA切割: 转座酶具有切割DNA的活性,将蛋白质-DNA结合位点附近的DNA切割,同时保持背景中的DNA完整。
  4. 4. 释放和收集: 切割后的DNA片段在背景中被释放,允许您选择性地收集蛋白质结合位点的DNA片段。
  5. 5. 测序与分析: 收集到的DNA片段经过测序分析,您可以获得高精度的蛋白质-DNA相互作用位点信息。

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